脂多糖结合蛋白多抗对大鼠肺泡巨噬细胞内毒素耐受性及Toll样受体4表达的影响

摘要

目的观察脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharidebindingprotein,LBP)多抗对大鼠肺泡巨噬细胞(alveolarmac-rophage,ΦAM)内毒素(lipopolysaccharide,LPS)耐受性与Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4)表达的影响,研究二者之间的联系。方法将从32只Wistar雄性大鼠分离所得ΦAM,按随机数字法等分为正常对照组(A)、LPS单次刺激组(B)、LPS二次重复刺激组(C)和LPS二次重复刺激+LBP多抗组。运用ELISA和RT-PCR方法分别检测各组大鼠ΦAM分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及TLR4mRNA表达的变化,Westernblot检测TLR4蛋白表达的变化。结果大鼠ΦAMTNF-α分泌和TLR4mRNA表达及TLR4的蛋白表达水平,A组分别为:(0·45±0·01),(0·77±0·06),(51·03±1·19)μg/L,B组分别为:(0·76±0·03),(1·55±0·25),(122·72±1·75)μg/L,B组与A组比较显著增加,P<0·01;C组分别为:(0·49±0·05),(1·13±0·07),(85·35±0·68)μg/L,C组与B组比较,明显减少,P<0·05。D组分别为:(0·28±0·07),(0·78±0·17),(61·06±1·36)μg/L,D组与C、B组比较,明显减少(P<0·05,P<0·01)。结论LPS重复刺激可使大鼠ΦAM对LPS产生耐受性;LPS耐受性的产生与TLR4表达下降相关;LBP多抗通过降低TLR4表达,提高大鼠ΦAM对LPS耐受性,此乃LBP抗体可用于治疗LPS所致急性肺损伤的部分分子生物学理论基础。