双启动子DNA疫苗载体pCMVnir的构建及其启动子的活性

摘要

目的:研制携带CMVie和NirB两种双启动子的DNA疫苗新型载体pCMVnir(pCN)。方法:设计细菌IVI启动子nirB,置换pTriEx鄄4中p10和T7lac启动子,获得pCN,将报告基因pEGFP鄄N1和pDsRed2鄄N1分别插入pCN构建成pCN鄄EGFP和pCN鄄DsRed两种报告质粒,转化减毒沙门菌SalmonellaSL3261和大肠杆菌DH5α;同时采Fugene脂质体,转染Hela细胞和前列腺细胞,检测pCN启动子的活性。结果:pCN的两个启动子都可高效转录和表达两种荧光报告基因,并且nirB是温和厌氧依赖性的。结论:成功构建了一种双启动子DNA疫苗表达载体pCN。