黑曲霉胞内β-葡萄糖苷酶分离提纯及其性质的研究

摘要

采用丙酮沉淀、DEAE—Sepharose阴离子交换层析、SephacrylS-200凝胶过滤、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析等步骤，从黑曲霉菌丝体中获得了一种凝胶电泳均一的胞内β-葡萄糖苷酶，其单亚基相对分子质量为122．7k，纯化倍数和得率分别为7．2和19．3％。以纤维二糖为底物时，该酶葡萄糖的抑制常数Ki为0．19mmol／L，Km值和Vmax分别为2．99mmol／L、1．49μmol／min。该酶最适反应温度60℃，最适反应pH为5．0；在60℃以下及pH3～6范围内均能保持稳定。甲醇、乙醇、正丁醇、丙酮和乙酸乙酯等有机溶剂对胞内β-葡萄糖苷酶有很好的激活作用。