抗小鼠SHP-1、SHP-2和SHIP三种蛋白酪氨酸磷酸酶单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

为了制备抗小鼠蛋白酪氨酸磷酸酶的单克隆抗体（mAb），分别以SHP-1、SHP-2和SHIP重组蛋白为抗原免疫BALB／c小鼠，通过B淋巴细胞杂交瘤技术制备抗相应磷酸酶的mAb。用Western blot检测mAb对重组蛋白和细胞中天然磷酸酶的反应性。共获得12株可稳定分泌抗磷酸酶mAb的杂交瘤细胞株。其中6株可分泌抗SHP—1 mAb（LX～SHPl．1～LX—SHP1．6），3株可分泌抗SHP-2 mAb（LX—SHP2．1～LX—SHP2．3），3株分泌抗SHIP mAb（LX—SHIP1～LX—SHIP3）。LX-SHP1．2～LX—SHP1．6，LX-SHP2．1和LXSHP2．3，以及LX—SHIP2和LX—SHIP3可应用于相应重组蛋白的Western blot检测。LX-SHP1．5，LX—SHP2，3，以及LX—SHIP2在EL-4细胞及原代T细胞相应天然磷酸酶分子的Western blot检测中有较好的实验效果。