不育病人精液中精子细胞的分离与鉴定

摘要

目的 :建立一种可从不育病人精液中分离出较多、较纯精子细胞的新方法。　方法 :收集 15例含细胞成分的不育病人精液 ,利用一种改良的非连续Percoll梯度 (15 %、2 2 %、30 %、4 0 %、5 0 %和 6 0 % )离心法分离精子细胞。于 18℃ 2 0 0 0r/min离心 30min后 ,精液细胞被分成单个的细胞组分 ;然后通过细胞计数、形态学、流式细胞术 (FCM )和免疫细胞化学等方法进行分析 ,选择含精子细胞纯度最高的组分。　结果 :经Percoll梯度离心后获得6个细胞组分 ,形态学和FCM分析表明 ,2 2 %组分中主要为精子细胞 [(91.85± 5 .18) % ,P <0 .0 0 5 ],平均密度为(1.0 10± 0 .786 )× 10 5/ml;30 %组分中含包括精子细胞在内的各种未成熟生精细胞 ;而白细胞主要位于 6 0 %组分中。　结论 :利用这种改良的非连续Percoll梯度离心法 ,可从不育病人的精液中分离到较多。