蟾酥注射液诱导肿瘤细胞凋亡和对bcl－2基因表达影响的研究

摘要

目的观察蟾酥注射液体外诱导的肿瘤细胞凋亡，探讨其对凋亡相关基因bcl-2蛋白和mRNA表迭的影响。方法采用Giemsa染色、透射电镜技术、AI计数、DNA片段化电泳、DNA片段化定量和流式细胞术对蟾酥注射液诱导的肿瘤细胞凋亡进行观察。同时采用流式细胞术和逆转录PCR检测蟾酥注射液作用后肿瘤细胞凋亡相关基因bcl-2蛋白和mRNA表达水平的变化。结果2．25×10^-1mg／L蟾酥注射液处理48h的HL-60，K562，U937细胞出现典型的凋亡细胞形态特征和生化特征改变。2．25×10^-1mg／L蟾酥注射液处理不同时间的HL-60、K562、U937细胞的凋亡指数．DNA片段化率、凋亡细胞率均高于对照组（P均〈0．05）。2．25×10^-1mg／L蟾酥注射液处理的HL-60细胞bcl-2蛋白表达阳性率高于对照组（P〈0．05），并且随着时间延长bcl-2蛋白表达有减少趋势。2．25×10^-1mg／L蟾酥注射液处理的HL-60细胞bcl-2基因mRNA相对表达量随着时间延长，有下降趋势。结论蟾酥注射液体外诱导肿瘤细胞HL-60，K56，U937发生细胞凋亡。诱导细胞凋亡可能是蟾酥注射液抗肿瘤的机制之一。蟾酥注射液在诱导肿瘤细胞凋亡时影响bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平，提示bcl-2基因表达的改变可能是蟾酥注射液诱导细胞凋亡的机制。