雏鸡心肌细胞分离及原代培养

摘要

为探讨雏鸡心肌细胞的分离、培养方法,采用胶原酶重复多次消化心肌组织,收集每次消化的上清液用含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基终止消化,离心沉淀细胞后再加入培养基混悬细胞。采用差速贴壁法和化学法纯化心肌细胞后置CO2培养箱孵育,并对培养的心肌细胞进行免疫组化鉴定。结果显示,未贴壁时心肌细胞呈圆形,培养12～24h心肌细胞开始贴壁生长,细胞伸出伪足呈梭形、多角形,3～4d后形成细胞簇,5～7d后细胞汇合成片。免疫组化结果表明α-SA抗原表达阳性,证明培养的细胞为心肌细胞,应用酶消化法可简便、快速地获得大量活力高的雏鸡心肌细胞。