日本血吸虫组织蛋白酶L1基因在大肠埃希菌中的表达

摘要

目的　在原核表达体系大肠埃希菌中进行日本血吸虫组织蛋白酶L1(SjCL1)基因表达。　方法　通过PCR从质粒pcDNA3 SjCL1中扩增得到SjCL1基因 ,定向克隆至原核表达载体pGEX 4T 1中 ,构建重组质粒pGEX SjCL1,将该重组质粒转化大肠埃希菌JM10 9,转化子经异丙基 β D 硫代半乳糖苷诱导表达 ,采用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹法 (Westernblotting)分析SjCL1基因表达产物。　结果　获得长约 1kb的PCR片段 ,构建了pGEX SjCL1质粒。SDS PAGE和Westernblotting检测表达产物 ,相对分子质量为 62 0 0 0。