体外诱导骨髓间质干细胞向心肌细胞的分化

摘要

目的研究在体外5-氮胞苷诱导骨髓间质干细胞定向心肌向分化的条件。方法取成年SD大鼠胫骨/股骨骨髓,分离并培养骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)。原代第3天用不同浓度5-氮胞苷作用不同时间。用免疫组化方法鉴定心肌肌钙蛋白(TnT)的表达,并通过RT-PCR鉴定GATA-4和β-MHC的表达。结果诱导后BMSCs细胞增生趋于停滞,10d可见细胞变成长梭状,20d细胞排列出现方向性,有TnT阳性细胞出现,并表达GATA-4和β-MHC。随着诱导药物5-氮胞苷浓度的增加,免疫细胞化学染色TnT阳性细胞增多,且表达更多的GATA-4和β-MHC,至5×10-5mol/L时基本达到峰值。5-氮胞苷对BMSCs的持续性诱导并不能明显增加免疫细胞化学染色TnT阳性细胞数量和GATA-4、β-MHC的表达。结论5-氮胞苷诱导后BMSCs可向心肌细胞分化,是临床心肌细胞成形术理想的供体细胞。