香丹注射液定向诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元的特点及其影响因素

摘要

目的探讨香丹注射液诱导成年SD大鼠骨髓间质干细胞 (rMSCs)定向分化为神经元样细胞的特点和影响因素。方法体外培养rMSCs至第 5代 ,培养基中加入碱性成纤维生长因子 (bFGF)预诱导2 4h ,更换含不同浓度香丹注射液的诱导液诱导 ,比较香丹注射液rMSCs分化 (诱导率 )在不同的培养基组成、诱导剂浓度和接种时的细胞密度等因素的影响 ,并用台盼蓝染色法、四唑盐比色法 (MTT法 )评判上述因素对诱导后细胞存活率的影响。结果 1%～ 5 %香丹注射液的诱导组 ,均可诱导rMSCs分化为神经元样细胞 ,诱导后 6～ 12h诱导率可达 (83 5± 3 8) % ,90 %以上的细胞存活时间 >36h。其他条件相同时 ,香丹注射液 3%～ 5 %的浓度组、无血清的D/F12 +N2 +bFGF诱导组和 2 5× 10 4 /cm2 的细胞接种密度 ,可得到最高的诱导率和细胞存活率。结论 3%～ 5 %的浓度、无血清D/F12 +N2 +bFGF(10 μg/L)和 2 5× 10 4 /cm2 的细胞接种密度是香丹注射液定向诱导rMSCs分化为神经元样细胞的最适条件。