干扰RNA沉默早期生长反应基因-1对缺氧复氧时心肌细胞氧化应激水平的影响

摘要

目的:研究心肌细胞H9c2缺氧复氧(H/R)过程中,si RNA干扰早期生长反应基因(Egr)-1对心肌细胞氧化应激水平的影响。方法:制作H9c2 H/R模型,缺氧时用被高纯度氮气饱和30 min的缺氧液,复氧时用正常DMEM培养基。用Egr-1-si RNA转染技术降低Egr-1表达。培养的H9c2随机分为对照,H/R,转染对照+H/R和si RNA+H/R组。倒置显微镜下观察细胞转染效率,Western blot检测Egr-1蛋白表达水平的变化。TBA法检测细胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)浓度,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果:倒置显微镜下可见Egr-1-si RNA转染效率达90%。H/R和转染对照+H/R组较对照组Egr-1蛋白表达明显增加、MDA浓度增加、SOD活力降低(P<0.05)。si RNA+H/R组较转染对照+H/R组Egr-1蛋白表达明显降低、MDA浓度明显下降、SOD活力明显增加(P<0.05)。结论:心肌细胞H/R时,干扰Egr-1蛋白表达能减轻细胞氧化应激损伤程度。