HPLC柱前衍生法测定谷丙甘氨酸咀嚼片含量

摘要

目的建立谷丙甘氨酸中谷氨酸、丙氨酸及甘氨酸的高效液相分析方法，并用该方法测定咀嚼片中3种氨基酸的含量，为该制剂的质量标准制定提供依据。方法谷丙甘氨酸咀嚼片中3种氨基酸含量测定采用异硫氰酸基苯酯柱前衍生化高效液相色谱法。色谱条件：色谱柱为Inertsil ODS-3V（4．6mm×250mm，5μm）；流动相A为0．1mol／L醋酸钠-醋酸缓冲液（pH6．5）／乙腈（93：7），流动相B为蒸馏水／乙腈（20：80）二元梯度洗脱分离；检测波长为254nm；流速为1ml／min；柱温为40℃。外标法计算3种氨基酸的含量。结果谷丙甘氨酸咀嚼片中谷氨酸、丙氨酸及甘氨酸分离度良好，在所考查的浓度范围内浓度对峰面积线性回归r〉0．99，平均回收率为98．7％，日内及日间RSD〈1．3％，三批样品中3种氨基酸的含量均在95％-105％之间。结论用HPLC柱前衍生方法可测定谷丙甘氨酸制剂中谷氨酸、丙氨酸及甘氨酸含量。