原生质体转化构建有机磷农药降解工程菌

摘要

降解有机磷农药甲胺磷、敌敌畏和对硫磷的菌株地衣芽孢杆菌 Ｐ１２（ Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ） 经溶菌酶处理获得原生质体，加入降解乐果的供体菌 Ｇ１ Ｄ Ｎ Ａ，经ρ（ Ｐ Ｅ Ｇ６ ０００） ＝ ３００ ｇ Ｌ－ １ 诱导，在液体再生培养基中振荡培养ｔ＝ ２０ ｈ ，使其恢复细胞壁后，离心收集菌体，涂布于含乐果的基础培养基上，经筛选得一转化子 Ｊ Ｐ Ｚ．其菌落形态明显不同于出发菌株，乐果平板连续传代１０ 次，性状保持稳定．在θ＝ ３０ ℃，１００ ｒ／ｍｉｎ 的培养条件下，３ ｄ 内对ρ（ 甲胺磷） ＝ ０ ．５ ｇ Ｌ－ １ ，ρ（ 敌敌畏） ＝ ０ ．２ ｇ Ｌ－ １ ，ρ（ 对硫磷） ＝ ０ ．１ ｇ Ｌ－ １ ，ρ（ 乐果） ＝ ０ ．３ ｇ Ｌ－ １ 的降解率分别为 Ｒｄ ＝ ７９ ．１ ％ ，４６ ．７ ％ ，２９ ．４ ％ 和４６ ．４ ％ ．