尼古丁对小鼠胚胎干细胞特异基因Oct-4转录的影响

摘要

目的　通过尼古丁对小鼠胚胎干细胞 (EmbryonicStem ,ES)特异基因Oct 4转录的影响来探讨尼古丁是否影响早期胚胎发育。方法　ES细胞选用饲养层培养法 ,尼古丁 (1～ 10 0 0nmol L)和 或 10 μmol L筒箭毒 (尼古丁乙酰胆碱受体阻断剂 )作用 2 4h后 ,纯化ES细胞 ,提取总RNA。首先扩增Fgf 5以观察纯化后ES细胞的纯度 ;同时用半定量RT PCR法观察尼古丁对Oct 4和 β actin表达的影响 ,及筒箭毒对尼古丁作用的影响。结果　尼古丁对β actin转录没有明显的影响 ,而可明显的增强Oct 4的转录 ;筒箭毒单独作用ES细胞可提高Oct 4的转录 ,而在尼古丁同时存在的情况下 ,筒箭毒对Oct 4的作用将随着尼古丁浓度的增加而减弱 ,当尼古丁的浓度为 10 0～ 10 0 0nmol L时 ,筒箭毒可明显抑制尼古丁诱导的Oct 4的表达。结论　研究表明 ,Oct 4的转录水平和胚胎干细胞的命运密切相关 ,维持胚胎干细胞的未分化状态需要Oct 4保持相对恒定的转录水平。因而 ,尼古丁对Oct 4转录的影响可能会影响胚胎干细胞的发育和分化 。