ERK信号通道调控大鼠气道平滑肌细胞的增殖与凋亡(英文)

摘要

为了了解ERK信号通道对正常大鼠气道平滑肌细胞（aimay smooth nilscle cells，ASMCs）增殖与凋亡的调控．通过对正常大鼠ASMCs原代培养，4～7代用于实验，以ERK激动剂表皮生长因子（EGF）和抑制剂PD98059干预ASMCs生长，采用RT-PCR和免疫荧光染色观察ASMCs上ERK mRNA和蛋白的表达，MTT法、^3H-TdR掺入法检测ASMC增殖，Hoechst染色和Annexin-Ⅴ FITC PI双染色法检测细胞凋亡，Western免疫印迹检测ERK1／2、磷酸化ERK1／2和proeaspase-3蛋白的表达。结果发现ASMCs上存在ERK mRNA和蛋白的表达，与空白对照组比较，PD98059干预后ASMCs的A490值和细胞DNA合成量均减少（P〈0．05），细胞凋亡指数、早期凋亡细胞百分率均增高（P〈0．05），ERK1／2、磷酸化ERK1／2表达和ERK活化率均降低，procaspase-3蛋白的表达增高．EGF干预后ASMCs的A490值和细胞DNA合成量均增高（P〈0．05），细胞凋亡指数、早期凋亡细胞百分率均下降（P〈0.05），ERK1／2、磷酸化ERK1／2表达和ERK活化率均增高，procaspase-3蛋白的表达降低．P＋E组无明显差异（P〉0．05）．ERK信号通道参与大鼠ASMCs增殖和凋亡的调控，ERK对大鼠ASMCs凋亡的调控与proeaspase-3蛋白有关，这一发现将有助于对哮喘ASMCs异常增殖调控机制的深入研究．