八肽胆囊收缩素激活钙离子通道和酪氨酸激酶诱导豚鼠心肌细胞内的游离钙增高(英文)

摘要

探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对豚鼠单个心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)的影响及其信号转导机制。Fluo 3-AM标记酶消化法分离的单个心室肌细胞,用激光共聚焦显微镜测定细胞内[Ca2+]i的浓度。[Ca2+]i的变化用荧光强度(Fi)和相对荧光强度(Fi/F0％)表示。实验结果如下:(1)在含Ca2+1.0 mmol/L的Tyrode’s液中,CCK-8(1-104pmol/L)均可引起[Ca2+]i快速显著上升(P<0.01)。(2)用钙离子鳌合剂EGTA(3 mmol/L)和钙离子通道阻断剂nisoldipine(0.5μmol/L)预孵育心肌细胞5 min,CCK-8(102pmol/L)仅可引起[Ca2+]i缓慢轻度上升(P<0.01)。(3)用非选择性CCK受体拮抗剂丙谷胺(proglumide 6μmol/L)或酪氨酸激酶抑制剂genistein(1μmol/L)预孵育心肌细胞5 min,则完全抑制CCK-8诱导的[Ca2+]i升高(P<0.01)。 CCK-8可通过激活其受体控制的Ca2+通道,引起Ca2+内流,诱导细胞内Ca2+释放,引起豚鼠单个心肌细胞内[Ca2+]i上升,此作用可能由酪氨酸激酶介导。