人DcR3cDNA克隆及其在COS-7细胞中的表达

摘要

目的克隆人DcR3分子的cDNA,将其重组入真核表达载体,并表达于COS-7细胞。方法以PCR方法克隆编码人DcR3分子的cDNA,对其序列进行测定。将测序正确的DcR3cDNA克隆入真核表达载体pAAV-IRES-hrGFP,构建重组表达载体。采用脂质体法转染COS-7细胞,用Western blot检测和激光共聚焦检测重组DcR3分子在COS-7细胞中的表达。结果PCR方法扩增出一1000bp左右的基因片段,插入pAAV-IRES-hrGFP构建重组表达载体后,经序列测定证实扩增的片段为人DcR3分子cDNA。将重组子转染COS-7细胞,Western blotting和激光共聚焦检测到DcR3分子的表达。结论成功地克隆并在COS-7细胞中表达了DcR3分子。