犬骨髓间充质干细胞体外培养及诱导成软骨特性初步研究

摘要

目的:观察月龄、来源部位对犬骨髓MSCs体外增殖能力及成软骨细胞分化能力的影响,对软骨组织工程种子细胞的选择提供参考。方法:体外分离、培养4月龄、12月龄Beagle犬髂骨和胫骨骨髓中的MSCs,向软骨细胞诱导分化。依靠形态学观察、原代集落生成率、MTT法测生长曲线等方法观察各组MSCs的增殖能力,通过GAG含量、Ⅱ型胶原免疫组化比较诱导成软骨细胞效果。结果:4月龄犬髂骨与胫骨来源MSCs体外增殖特性及诱导成软骨细胞特性比较差异无统计学意义;12月龄犬髂骨组MSCs较胫骨组原代融合时间短、集落生成率高、生长曲线左移,但成软骨细胞特性无差异。相同部位比较,4月龄来源MSCs均较12月龄表现出较高的增殖能力和成软骨细胞分化能力,差异具有统计学意义。结论:成年犬不同部位来源MSCs增殖能力不同,分化能力相同;幼龄犬MSCs增殖、分化能力均高于成年犬。