生物素化抗细胞因子单克隆抗体的制备

摘要

目的探讨生物素化单克隆抗体的制备方法。方法应用经超滤、硫酸铵沉淀、Protein G亲和层析纯化的来源于杂交瘤细胞培养上清中的大鼠抗小鼠 IL - 5、IL - 4和 IFN -γ单克隆抗体 ,以每 mg抗体加入生物素制剂 80μg室温反应6 0 min,其反应液经 Sephadex G- 2 5层析纯化 ,然后用生物素 -亲和素 EL ISA法测定所制备的生物素化抗体活性。结果该法制备的生物素化抗体活性高 ,用于检测感染巴西钩虫的 IL - 5转基因小鼠和非转基因小鼠的血清标本敏感性好。结论该生物素化抗体的制备方法具有制备简单、稳定性好等优点。