卤代烷烃脱卤酶基因在拟南芥中反式失活系统的建立

摘要

以细菌Xanthobacterautotrophicus卤代烷烃脱卤酶基因为遗传负选择标记 ,建立了该基因在拟南芥中反式失活的实验系统 .在卤代烷烃脱卤酶转基因拟南芥中 ,有 1株表现为转基因失活 ,离体核run off转录实验表明为基因转录后沉默 (这里特指沉默位点 ) .用这一转基因沉默植株与同源转基因高效表达植株 (这里特指同源转基因位点 )杂交 ,结果 96 %的F1代植株表现为同源转基因反式失活 .将F1代植株自交 ,使部分沉默位点与反式失活的同源转基因位点分离 ,结果 2 0 0株子代中有 42株表现DhlA活性 ,15 8株无DhlA活性 ,即dhlA沉默植株与表达植株之比为 3 .76∶1,表明沉默位点是以孟德尔显性因子方式使同源转基因位点反式失活的 .