一种新的中温酸性α-淀粉酶的分离纯化及酶学性质

摘要

从Bacillus sp．中分离纯化了一种新的中温酸性α-淀粉酶，并对其酶学性质进行了研究，粗酶经硫酸铵沉淀、DEAE—Sepharose Fast Flow阴离子层析、Sephadex G-75凝胶过滤层析等步骤后获得电泳均一的α-淀粉酶，其分子量（Mr）约为56X10^3，该酶最适反应pH为5．0，在pH5．0～11．0范围内稳定，具有较好的耐酸特性，该酶最适反应温度为40～50℃，在40～60℃范围内稳定，在60℃、pH4．5时，该酶能快速有效水解可溶性淀粉；在pH5．0时该酶对多种生淀粉底物也具有良好的水解作用，因此，该酶有助于解决中温条件淀粉加工行业中，液化酶和糖化酶由于适用pH值的差异而无法联用的难题，是一种具有研究价值和应用前景的中温酸性α-淀粉酶，经LC—MASS—MASS分析得到了酶蛋白中两个肽段的氨基酸序列，通过比对发现，该酶与NCBI中已报道的α-淀粉酶序列具有一定的同源性，同时，在氨基酸水平上也存在着差异。