激光扫描共聚焦显微镜观察细胞在丝素纤维织物上的生长情况

摘要

利用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术,用活细胞荧光示踪剂标记细胞,观察细胞在天然丝素纤维和再生丝素纤维上的生长情况。用含10μmol/L Cell-Tracker CM-DiI(Molecular Probes Company)的无血清RPMIl640培养液,室温标记V79、3T3和原代心肌细胞30min,接种于Glass Bottom Dish中,将两种受试材料分别放入Glass Bottom Dish中,继续培养。在加入受试材料后1、2、3、4、5,7天,利用LSCM技术,采用双通道同时扫描的方式,一个通道的激发波长为534nm,发射波长为540-650nm,另一个通道使用微分干涉差成像技术,动态观察细胞在再生丝素纤维受试材料的生长情况。实验发现V79细胞和3T3细胞在天然丝素纤维上是接种后5天明显增多,在再生丝素纤维上生长数量是接种后4天明显增多,而且比在天然丝素纤维生长的数量多。原代心肌细胞在天然和再生丝素纤维上生长得非常少。