丙型肝炎病毒基因组部份NS5区蛋白基因在大肠杆菌中的表达

摘要

在大肠杆菌中表达了丙型肝炎病毒基因组ＮＳ５区Ａ段和部份Ｂ段蛋白。ＮＳ５Ａ蛋白溶于水，可经过ＧＳＴ亲和层析柱纯化；ＮＳ５Ｂ蛋白不溶于水，经ＰＢＳ－ＴｒｉｔｏｎＸ－１００洗涤，尿素溶解后，通过离子交换柱纯化。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析，ＮＳ５Ａ蛋白除在５７ｋＤ左右有条带外，还有不同程度的降解产物；ＮＳ５Ｂ蛋白主要在５８ｋＤ左右有条带出现。为查明表达蛋白抗体在病人血清中的分布，取９４份已经Ｃ３３ｃ或Ｃ２２检测过的血清，用间接ＥＬＩＳＡ法查抗体，结果在７１份Ｃ３３ｃ或Ｃ２２阳性血清中，抗ＮＳ５Ａ抗原的抗体检出率为６４．８％；抗ＮＳ５Ｂ的检出率为５７．７％；ＮＳ５Ａ和ＮＳ５Ｂ蛋白抗体的总符合率为７５．５％。暂时未发现单独抗ＮＳ５Ａ或ＮＳ５Ｂ抗体阳性的血清。