抗丁型肝炎病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性

摘要

应用杂交瘤技术,以大肠杆菌基因工程表达的丁型肝炎病毒抗原(HDAg)免疫Balb/C小鼠,首次建立了6株分泌抗丁型肝炎病毒(HDV)单克隆抗体细胞株。它们的培养上清和腹水的抗体滴度分别是50～1000和1000～40000。Ig亚类4株为IgG1,1株IgG2a,1株IgG。这些单克隆抗体能和HDAg结合,而不与大肠杆菌裂解液,大肠杆菌表达的HBcAg、HBeAg,以及HBsAg阳性血清和正常人血清发生反应。它们与HDAg的结合能被抗HD阳性血清所阻断,说明这种结合是特异的。这些McAb的特异性和亲和性与多克隆抗体相同。以McAb做包被抗体和抗HDV多克隆酶标抗体配对制成EIA试剂,检测血清标本中的HDAg和抗-HD,与PcAbEIA的符合率分别为94.44％和98.68％。以PcAb包被,配以酶标记的McAb;或以McAb包被,配以酶标记的PcAb均可检测大肠杆菌表达的HDAg,而且效果都优于PcAb-EIA。用这些McAb对国外基因工程表达的HDAg进行的抗原位点分析首次证明,在这些HDAg上至少有3个不同的抗原位点。通过对基因工程表达的HDAg和我国人血清中HDAg的抗原位点的分析,认为两者至少在空间构型上有不同。