大熊猫皮肤成纤维细胞系的建立和冷冻保存

摘要

简要介绍了大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)皮肤成纤维细胞的建系过程和冷冻保存。在研究中,采用200 IU/ml的胶原蛋白酶Ⅰ酶在4℃下解离皮肤组织。在DME/Ham’s F12和M199两种培养液中添加100 IU/ml青链霉素、5μg/ml两性霉素B、5μg/ml M-PlasmocinTM、2 mmol/L L-Glu、10μg/ml的胰岛素4、0 ng/mlEGF和20%(原代)或10%(传代)FBS组成培养液,分别用于细胞的贴壁培养和植块培养,均获得培养成功。用PBS添加0.4%BSA、0.1 mol/L蔗糖和10%DMSO组成的冷冻保存液对细胞进行冷冻保存,解冻后获得93.258%的活率,解冻细胞再次培养能正常生长。研究结果表明,大熊猫皮肤成纤维细胞建系和冷冻保存获得成功。