无血清条件对诱导转染pEGFP-C1/Akt的骨髓间充质干细胞凋亡的影响

摘要

目的探讨无血清条件对诱导pEGFP-C1/Akt转染的骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡的影响。方法实验分实验组(pEGFP-C1/Akt转染MSCs)、抑制组(pEGFP-C1/Akt转染MSCs+PI3K/Akt特异性抑制剂)和对照组(MSCs)。在无血清培养基条件下,分别在4、12、24和36h共4个时间点利用RT-PCR检测Akt及Caspase-3mRNA表达,Western blot检测Akt蛋白表达,免疫组化检测Caspase-3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果在无血清培养4、12、24和36h后,实验组的Akt mRNA和蛋白的表达均高于抑制组及对照组(P0.05)。结论Akt可能通过PI3K/Akt途径抑制其下游底物Caspase-3的表达,从而抑制无血清诱导的MSCs凋亡。