自杀基因系统HSV-TK/GCV联合声动力疗法对人肺癌细胞NCI-446的体外杀伤实验

摘要

目的探讨自杀基因系统HSV-TK/GCV联合声动力疗法对人小细胞肺癌NCI-446细胞的体外杀伤作用。方法利用荧光和RT-PCR检测方法,筛选出含HSV-TK基因的阳性克隆株NCI-446/TK。用MTT法检测不同浓度的GCV对NCI-446/TK细胞的杀伤效应,以及不同浓度混合NCI-446和NCI-446/TK细胞后的旁观者效应。同时,将HSV-TK/GCV自杀基因系统与声动力疗法进行联合,通过MTT法测定细胞存活率,并以流式细胞术检测细胞周期及凋亡率。结果当GCV浓度为0.2 mg/L时,筛选出的阳性克隆株NCI-446/TK细胞的生长受到明显的抑制(P<0.01),并且随着GCV浓度的递增,抑制效应越明显。当NCI-446/TK细胞占总细胞的10%时,有46%的混合培养细胞生长受到抑制(P<0.01),其抑制效应随NCI-446/TK细胞所占比例的增加而增加。将HSV-TK/GCV自杀基因系统与声动力疗法进行联合后,其细胞存活率明显低于单一治疗组(P<0.01),并且G0/G1期细胞所占比例及凋亡率均高于单一治疗组。结论 HSV-TK/GCV自杀基因系统的杀伤效应随着GCV浓度的递增而增强,并且有明显的旁观者效应。与声动力疗法联合后,其作用效果优于单一治疗组。