HSV-tk/GCV自杀基因系统对人喉癌细胞体外旁观者效应及体内抑瘤作用的实验研究

摘要

该试验包括:1.重组逆转录病毒载体pLXSN-tk在质脂体介导下,转导PA317包装细胞,G418筛选抗性克隆并扩大培养.2.将重组病毒感染人喉癌细胞Hep-2,筛选出G418抗性细胞克隆,命名为Hep-2/tk.3.将Hep-2/tk与Hep-2细胞按不同比例混合,接种于96孔板培养,24h后加入GCV使终浓度为5μg/ml,常规培养6天后测定细胞存活率,结果显示Hep-2/tk细胞占20﹪时,细胞存活率为47﹪,而Hep-2/tk比例为40﹪-100﹪时细胞存活率均在20﹪以下.4.裸鼠皮下接种1×10<'6>/0.1ml Hep-2/tk、Hep-2/0及Hep-2细胞,第8天开始腹腔注射GCV治疗(50mg/kg,2次/d),连续测量肿瘤结节的大小,第20天处死裸鼠并称量瘤重.肉眼观察肿瘤局部大体形态.结果显示,Hep-2/tk组肿瘤体积及瘤重均显著小于空白对照组Hep-2及空载体对照组Hep-2/0(p<0.05),而空白对照组与空载体对照组之间无显著差异(p>0.05).上述研究表明:HSV-tk/GCV自杀基因系统对荷人喉癌裸鼠有显著的抑制作用,有望成为治疗喉癌的有效策略.

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