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HSV-tk自杀基因表达载体的构建及HSV-tk/GCV系统对肝癌细胞作用的体外研究

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缩略语表

前言和文献回顾

第一部分HSV-tk自杀基因逆转录病毒表达载体的构建及包装

引言

材料和方法

结果

讨论

第二部分HSV-tk/GCV系统对SMMC-7721细胞作用的体外实验

引言

材料和方法

结果

讨论

小 结

参考文献

个人简历和研究成果

致 谢

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摘要

目的:构建含有HSV-tk自杀基因逆转录病毒表达载体;研究HSV-tk/GCV系统对人肝癌细胞的体外杀伤作用.方法:利用重组DNA技术,将HSV-tk基因亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN中,重组质粒pL(tk)SN在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,用NIH3T3测定病毒滴度,将重组病毒感染人肝癌细胞SMMC-7721,G41 8筛选出抗性克隆,命名为SMMC/tk,以PCR、RT-PCR对HSV-tk基因修饰的SMMC-7721细胞进行鉴定.通过观察基因修饰细胞生长状况、MTT法及流式细胞仪观察GCV对SMMC/tk细胞的杀伤效应.结论:tk自杀基因逆转录病毒表达载体的成功构建为肝癌的基因治疗提供部分实验基础.人肝癌细胞SMMC-7721对HSV-tk/GCV系统高度敏感,可望为肝癌基因治疗提供有效途径.

著录项

  • 作者

    张志伟;

  • 作者单位

    第四军医大学;

  • 授予单位 第四军医大学;
  • 学科 病理学与病理生理学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 师建国;
  • 年度 2004
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 肝肿瘤;
  • 关键词

    HSV-tk基因; 肝癌; 基因表达; 基因治疗;

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