核因子κB的反义寡核苷酸对肿瘤坏死因子α诱导的血管细胞黏附分子-1表达的影响

摘要

目的:探讨人脐静脉内皮细胞(HUVECs)ECV304细胞株中,核因子κB(NF-κB)的反义寡核苷酸(AODNs)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导血管细胞黏附分子(VCAM-1)表达的影响。方法:将培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304分为3组,其中2组用脂质体介导法转染寡核苷酸(ODNs)分别转染AODNs、正义寡核苷酸(SODNs);另1组(阳性对照组)不转染ODNs。流式细胞仪荧光活细胞计数检测转染效率及NF-κB的表达情况,逆转录-聚合酶链反应、流式细胞仪检测及免疫组织化学染色测定AODNs对TNF-α诱导的VCAM-1表达的影响。结果:脂质体介导的转染方法能将ODNs有效地转染至HUVECs中,且AODNs可有效抑制NF-κB的复制合成。NF-κB P65的AODNs可使TNF-α刺激的人脐静脉内皮VCAM-1 mRNA表达下调33.08%,蛋白质水平的表达下调48.27%,并与免疫组织化学染色显示结果一致。结论:NF-κB的AODNs可显著下调NF-κB调控的、与动脉粥样硬化相关的黏附分子表达。