猪流行性腹泻病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与初步应用

摘要

猪流行性腹泻（PED）在全球的大流行给养猪业造成重大经济损失,为快速特异地检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）,本研究根据PEDV N基因保守序列设计合成引物,通过对RT-PCR反应体系和反应条件优化,建立了一步法RT-PCR检测PEDV的方法。结果显示,该方法检测敏感性达2 016拷贝/μl;对猪传染性胃肠炎病毒、猪A群轮状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒等检测结果均为阴性,具有良好的特异性;批内变异系数为1.14%~2.15%,批间变异系数为2.46%,具有良好的重复性。应用该方法对辽宁省93份临诊病料进行了检测,样品阳性率为69.89%（65/93）,为PED的快速诊断和流行病学调查提供了有效的技术手段。