组蛋白-DNA共振光散射法的建立及应用

摘要

目的　建立灵敏度高、简单方便、试剂安全的共振光散射方法测定生物体DNA含量。方法　在 pH5 5的HAc-NaAc缓冲体系中 ,将组蛋白与DNA混合 ,在入射光波长和荧光波长相同条件下 ,用普通荧光分光光度计测定溶液的共振光散射强度 ;光散射强度与DNA浓度呈良好线性关系时测定核酸含量 ;应用该法检测鼠肝和酵母体内的DNA含量。结果　扫描光谱显示最大光散射波长为 5 5 1nm ,测定最佳条件为pH5 5 ;组蛋白用量 10 μg/ml。ctD -NA、fsDNA、hpDNA等 3种核酸均与光散射强度有良好线性关系 ,相关系数均大于 0 99。与常规分光光度法对照测定样品DNA含量 ,相对误差 <10 %。结论　该方法灵敏度优于常规方法 2～ 3个数量级 ,快速方便 。