血红素加氧酶-1中第39位赖氨酸对电子传递功能的影响

摘要

目的验证血红素加氧酶－１（ＨＯ－１）中的第３９位赖氨酸（Ｋ３９）对电子传递的影响。方法通过定点诱变将Ｋ３９置换为酸性氨基酸谷氨酸（Ｅ），并将得到的变异型酶基因克隆到高度表达的载体上表达，提纯变异型ＨＯ，测定其活性，比较变异型酶与野生型酶的活性区别，以了解高保守的碱性氨基酸Ｋ３９对电子传递的影响。结果　ＨＯ催化血红素的体外反应，由抗坏血酸提供电子时，变异型酶Ｋ３９Ｅ与野生型酶比较活性没有显著性差异；而ＨＯ催化血红素的模拟体内反应，由ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｐ４５０还原酶提供电子时，变异型酶Ｋ３９Ｅ与野生型酶相比活性有显著性差异。结论　ＨＯ的碱性氨基酸Ｋ３９在接受并传递ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｐ４５０所提供的电子时具有重要作用。