根癌农杆菌介导的高赖氨酸蛋白基因转化叶用莴苣的研究

摘要

构建了植物表达载体pLBI,该载体携带 35S启动子、高赖氨酸蛋白基因 (LRP)、NPTII基因和NOS终止子 .对影响根癌农杆菌 (AgrobacteriumtumefaciensL .)转化的多种因素进行探索后 ,建立了一种农杆菌介导的稳定的叶用莴苣遗传转化系统 .选择目前生产上大量推广应用的叶用莴苣品种 ,以其无菌苗子叶为外植体 ,经农杆菌LBA4 4 0 4 (含质粒pLBI)感染 ,在含 ρ(Kan) /mgL-1=10 0的芽分化培养基上筛选转化芽 ,转入含相同浓度抗生素的生根培养基上进行生根筛选 ,直至得到完整的再生植株 .PCR扩增及Southernblot的检测结果均表明 ,高赖氨酸蛋白基因已整合到叶用莴苣基因组中 .图 4表 4参