大鼠肺动脉平滑肌细胞缺氧后STAT3活性变化对细胞癌基因c-jun mRNA表达及细胞增殖的影响

摘要

目的　观察大鼠肺动脉平滑肌细胞缺氧后信号转导和转录活化因子3 (STAT3 )活性变化对细胞癌基因c junmRNA表达及细胞增殖的影响。方法　组织块法原代培养肺动脉平滑肌细胞(PASMCs) ,用AG490预孵育后进行缺氧处理,Westernblot检测缺氧2、4、6、8、12h组STAT3酪氨酸活性水平变化;半定量RT PCR检测缺氧2、4、6、8、12h组细胞中c junmRNA表达水平变化;流式细胞仪检测细胞周期变化。结果　Westernblot定量分析示缺氧培养6h组STAT3酪氨酸磷酸化水平升高,12h组达高峰;缺氧2h细胞c junmRNA表达升高,6h达高峰,8h下降;细胞在缺氧6h出现G0 G1 期细胞比例明显减少,S +G2 M期细胞比例明显增加,并随缺氧时间延长变化更显著。与对照组细胞相比,AG490处理组细胞在缺氧各时相点STAT3酪氨酸磷酸化水平及c junmRNA表达明显降低,同时G0 G1 期细胞比例显著增加,S +G2 M期细胞比例显著减少。结论　①STAT3活化和c junmRNA表达增加参与缺氧PASMCs增殖;②AG490可通过抑制STAT3活性下调c junmRNA表达,从而抑制缺氧诱导的PASMCs增殖。