纳米磁性壳聚糖微球固定化酵母醇脱氢酶的研究

摘要

建立了以纳米级磁性壳聚糖微球(magnetic chitosan microspheres,M-CS)为载体固定化酵母醇脱氢酶(yeast alcohol dehydrogenase,YADH)的方法,优化了YADH的固定化条件,考察了固定化酶的性质。结果表明,M-CS呈规则的圆球形,粒径在30nm左右,具有较好的磁响应性。酵母醇脱氢酶固定化适宜条件为:50mg磁性壳聚糖微球,加入20ml0.25mg/ml酵母醇脱氢酶(蛋白质含量)磷酸盐缓冲液(0.05mol/L,pH7.0),在4℃固定2h。M-CS容易吸附酵母醇脱氢酶,但吸附的酶量受载体与酶的比例、溶液的离子浓度、溶液pH的影响明显,而温度对吸附的酶量的影响则相对较弱。相对于游离的酵母醇脱氢酶,固定化酶的最适温度略有升高,可明显改善其热稳定性、酸碱稳定性、操作稳定性和贮存稳定性。