2型糖尿病伴牙周炎牙周膜干细胞成牙骨质分化能力的研究

摘要

目的探讨2型糖尿病伴牙周炎患者的人牙周膜干细胞(Periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成牙骨质(Cementogenic)分化能力的变化。方法组织块法与单克隆法分离培养扩增健康来源牙周膜干细胞(H-PDLSCs)和2型糖尿病伴牙周炎来源的牙周膜干细胞(DP-PDLSCs);流式细胞仪鉴定其细胞表面分子CD45、CD90、CD44、CD29、CD166;CCK-8检测两组细胞7d增殖能力;ALP染色检测两组细胞成牙骨质诱导14d后矿化形成能力;两组细胞成牙骨质诱导7d后,RT-PCR检测ALP、OPN、OCN、CEMP1、CAP mRNA基因表达;两组细胞成牙骨质诱导14d后,Western blot检测OCN、CEMP1、CAP蛋白表达。结果H-PDLSCs组细胞表面分子CD45、CD90、CD44、CD29、CD166检测结果分别为0.02%、99.94%、99.59%、100.00%、99.99%,证明实验用细胞为外胚间充质来源;CCK-8检测两组细胞发现H-PDLSCs增殖能力高于DP-PDLSCs,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,DP-PDLSCs ALP、OPN、OCN、CEMP1、CAP mRNA的表达量均低于H-PDLSCs;Western blot检测结果趋势与RT-PCR结果相一致,成牙骨质诱导14d OCN、CEMP1、CAP蛋白表达量DP-HPDLSCs低于H-PDLSCs。结论推测在2型糖尿病伴牙周炎疾病状态下,牙周膜干细胞的成牙骨质分化能力降低,可能源于全身因素和局部炎症因素的影响。