囊状幼虫病病毒衣壳蛋白肝素结合基序鉴定及其抗感染作用分析

摘要

目的鉴定囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)药物结合口袋蛋白2(drug-binding pocket protein 2,Dbpp2)的肝素结合基序,并测定肝素结合基序及其衍生肽的抗SBV感染活性。方法采用在线软件对Dbpp2进行二级结构预测和同源建模,以搜索肝素结合基序,利用肝素琼脂糖珠检测SBV、Dbpp2及其肝素结合基序突变体与肝素的结合能力、肝素结合基序抑制Dbpp2结合肝素的能力,并检测肝素结合基序及其衍生肽对SBV感染的中华蜜蜂(Apis cerana cerana)幼虫的治疗效果。结果SBV和Dbpp2可结合肝素,Dbpp2 C-端暴露在表面的富含碱性氨基酸的柔性环(KPANRPRR)为肝素结合基序,该基序可抑制Dbpp2结合肝素。KPANRPRR及其衍生肽KPAARPRR、KPRN-RPRR、KPRARPRR、KPRWRPRR、KPRWRPRRW均具有降低SBV感染导致幼虫死亡率的作用,其中,KPRARPRR的治疗效果最佳。结论本研究为阐明SBV-氨基萄聚糖(glycosaminoglycan,GAG)相互作用奠定了基础,也为基于相互作用开发治疗SBV感染的多肽提供了参考。