克里米亚-刚果出血热病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

摘要

目的建立一种快速、敏感检测克里米亚-刚果出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。方法分析克里米亚-刚果出血热病毒S基因片段核酸序列的保守性,设计实时荧光RT-PCR引物和探针,优化引物和探针浓度,确定最佳反应体系,并进行灵敏性、重复性、特异性检测。结果建立的克里米亚-刚果出血热病毒实时荧光RT-PCR方法的检测灵敏性为7.26×10^2 copies/μl,重复性好,与汉坦病毒等无交叉反应。结论建立的克里米亚-刚果出血热病毒实时荧光RT-PCR法能准确、快速地检测克里米亚-刚果出血热病毒。