阳桃（Averrhoa carambola）实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证

摘要

阳桃（Averrhoa carambola）具有很高的营养、药用及观赏价值，但功能基因组方面的研究基础较为薄弱。为使阳桃相关功能基因表达分析的定量实验结果更加准确，需要选择稳定性好的内参基因。然而目前还没有关于阳桃内参基因筛选的报道。本研究基于阳桃基因组及转录组数据，选取了α-TUB、β-TUB、Actin、UBQ、UBC4、EF1α和H2B共7个管家基因作为候选内参基因；利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测各候选内参基因在茎、叶、果、花序芽、叶芽及不同时期花序中的表达情况。使用软件geNorm、Normfinder和BestKeeper综合评估了候选内参基因的稳定性。结果表明，α-TUB和β-TUB在阳桃不同器官中稳定性最好，β-TUB和UBC4在阳桃不同时期花序中稳定性最好。此外，通过分析成花基因AP1（APETALA1）和开花抑制因子TFL1（TERMINAL FLOWER 1）的表达模式，进一步验证了内参基因筛选结果的可靠性。本研究筛选得到的稳定内参基因为后期开展阳桃相关功能基因表达分析的研究提供了基础。