聚乙二醇在酶联免疫吸附剂试验（ELISA）中的应用

摘要

＜正＞ 为使ELISA试验结果稳定、敏感,有报告在ELISA反应液中加入聚乙二醇（PEG）能加速病毒及细菌抗体的测定,并有助于灵敏度的提高。本文将此法试用于对乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的测定,其方法简述如下。 一、抗体包被:在聚苯乙烯微量反应板的每孔内加入0.1毫升用包被缓冲液（pH9.6,0.05M碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液）稀释至含量为10微克/毫升的羊抗HBs,置4℃冰箱过夜,用洗涤缓冲液（pH7.4,0.02MTris-Tween 20）洗涤三次。 二、样品反应:每孔加入用稀释缓冲液（含4％PEG的pH7.4 PBS-Tween 20）作1:10稀释的血清0.1毫升,每份样品同时测2孔,置43℃1小时,洗涤同上。 三、酶标记物反应:每孔内加入用稀释缓冲液适当稀释的过氧化物酶标记羊抗-HBs0.1毫升,置43℃1小时,洗涤同上。