雷公藤内酯醇对人胰腺癌PANC-1细胞的抑制作用及其可能的机制

摘要

目的:通过体内外实验观察雷公藤内酯醇（triptolide,TPL）对人胰腺癌PANC-1细胞生长和凋亡的抑制作用,并分析其对Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）、血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial cell growth factor,VEGF）的表达和肿瘤血管生成的影响。方法:以0、20、40、80 ng/ml的TPL作用于PANC-1细胞,MTT法和流式细胞术分别检测TPL对PANC-1细胞增殖和凋亡的影响,Western blotting检测TPL作用后PANC-1细胞中TLR4和VEGF的表达。建立PANC-1细胞裸鼠荷瘤模型并随机分为TPL组、PBS组,测量移植瘤的体积变化,治疗35 d后摘取瘤块,免疫组织化学方法检测移植瘤组织内TLR4、VEGF和CD31的表达,并计算微血管密度（microvessel density,MVD）。结果:与0 ng/ml组相比,PANC-1细胞经20、40和80 ng/ml的TPL处理24 h后,细胞凋亡率均显著升高[（4.7±1.0）%、（10.5±2.0）%、（21.1±4.2）%vs（2.6±0.5）%,P＜0.05或P＜0.01];48 h后,细胞增殖率均显著下降[（68.0±5.3）%、（59.6±5.0）%、（51.6±4.2）%vs（99.6±5.2）%,均P＜0.01],并较相同浓度TPL处理24 h时显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。80 ng/ml TPL组处理后PANC-1细胞中TLR4蛋白[（20.2±4.7）%vs（57.5±6.3）%,P＜0.01]和VEGF蛋白[（35.8±4.0）%vs（92.1±8.3）%,P＜0.01]的表达量显著低于未处理组。TPL治疗组第34天的裸鼠移植瘤体积显著小于PBS对照组[（510.9±79.8）vs（1 220.6±127.2）mm3,P＜0.01];TPL治疗组移植瘤组织内的TLR4、VEGF表达均显著低于PBS组[（3.2±0.6）vs（6.7±1.1）,（3.7±0.7）vs（7.1±1.2）;均P＜0.01),其MVD也显著低于PBS组[（12.2±4.0）vs（22.7±5.6）,P＜0.01]。结论:TPL能够抑制人胰腺癌PANC-1细胞及其裸鼠移植瘤的生长,并促进PANC-1细胞凋亡,其机制可能与TPL抑制TLR4、VEGF表达及肿瘤血管生成有关。