基于恒温扩增RPA技术的玉米转基因成分的鉴定

摘要

随着转基因技术的成熟，新型转基因产品相继问世，社会对其安全性的关注度也逐渐提高。而抗草丁膦（bialaphos resistance, Bar）基因作为转基因玉米中最常见的外源基因，常作为检测转基因的靶标元件。重组酶聚合酶扩增技术避开聚合酶链式技术反应时间长、程序繁琐和荧光定量、芯片等技术依赖高端设备，价格高昂等缺点。为简单、快速且不依赖于高端设备的转基因玉米检测新方法提供了新途径。本研究选取重组酶聚合酶扩增技术，设计并筛选最佳引物对，通过实验优化，最终得出最佳反应温度37℃及最佳时间为20 min的优化反应体系。经试验优化后的RPA扩增体系特异性良好，灵敏度可达fg级，为快速、恒温、现场检测提供了一种新手段。