核受体视黄醇X受体α对高脂喂养的载脂蛋白E基因敲除小鼠Wnt、β-连环蛋白的调节作用及对动脉粥样硬化的影响

摘要

目的观察视黄醇X受体(RXR)激动剂蓓萨罗丁(Bex)对高脂喂养的载脂蛋白E(APOE)基因敲除(APOE-/-)小鼠胸主动脉Wnt、β-连环蛋白(β-catenin)的调节作用及对动脉粥样硬化的影响。观察核受体RXRα对血小板源生长因子(PDGF)诱导的平滑肌细胞增殖迁移与Wnt-β-catenin信号转导的关系,探讨核受体RXRα介导Wnt-β-catenin通路对动脉粥样硬化的影响及机制。方法动物实验:8只C57小鼠作为正常对照组,24只APOE-/-小鼠随机分为3组(每组8只):APOE-/-组,APOE-/-+高脂组(高脂喂养APOE-/-小鼠建立动脉硬化模型),APOE-/-+高脂+Bex10组[蓓萨罗丁10 mg/(kg·d)灌胃,干预时间3个月]。检测各组血脂水平,HE染色图像分析测定胸主动脉斑块面积,免疫印迹法检测小鼠胸主动脉Wnt、β-catenin的蛋白表达。细胞实验:培养小鼠胸主动脉平滑肌细胞,(1)分别予PDGF 0、1、3、10、30 ng/mL对平滑肌细胞干预24 h,Western blot方法检测Wnt、β-catenin蛋白表达。(2)PDGF(10 ng/mL)及RXRα激动剂9-顺式维甲酸(9 cis-RA)10-7 mol/L干预24 h,免疫杂交法检测细胞Wnt、β-catenin蛋白水平。(3)PDGF(10 ng/mL)、RXRα激动剂9-cis-RA 10-7 mol/L及β-catenin抑制剂FH535(10-6 mol/L)干预24 h后,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)渗入法测细胞增殖水平,干预4 h,膜迁移法检测细胞迁移。结果与C57组相比,APOE-/-组血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平升高(均P0.05)。与C57组相比,APOE-/-组胸主动脉Wnt、β-catenin蛋白水平升高,胸主动脉斑块面积显著增加[(64.29±9.87)比0μm2,P0.05)。结论RXRα激动剂可通过下调Wnt、β-catenin表达,抑制平滑肌细胞增殖、迁移,降低动脉粥样斑块形成。核受体RXRα可能通过介导Wnt-β-catenin信号通路调节动脉粥样硬化作用。