二氢青蒿素通过诱导铁死亡抑制肝癌细胞生长

摘要

二氢青蒿素(dihydroartemisinin,D H A)是青蒿素的一种衍生物,在多种肿瘤中表现出明显的抗肿瘤活性,但其具体机制不详。本文探讨了D H A对肝癌细胞的毒性作用机制。利用C C K-8试剂检测D H A对肝癌细胞株活力的影响,通过荧光探针染色及流式细胞术分析细胞内R 0 S及脂质过氧化物水平的变化;通过谷胱甘肽测定试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽含量的变化,并通过免疫印迹分析D H A作用下细胞内铁死亡通路蛋白质中G P X 4的变化。结果发现,D H A能显著抑制SMMC-7721及H uh-7细胞活力,其半数抑制浓度分别为23.74 p m o l/L及26.92 jjumol/L。在35 pm ol/L D H A处理下,SMMC-7721及H uh-7细胞内R 0 S分别升高2.6倍和2.1倍,月旨质过氧化物升高2.3倍和1.7倍。D H A可诱导细胞内G SH含量下降,并能下调铁死亡相关蛋白质G P X 4蛋白水平。通过利用小分子抑制剂进行功能恢复实验发现,R 0 S抑制剂、铁螯合剂及铁死亡抑制剂都可不同程度恢复D H A引起的细胞活力下降。进一步检测发现,铁死亡抑制剂可抑制D H A诱导的脂质过氧化,并恢复G SH含量及G P X 4蛋白水平。结果表明,在肝癌细胞中,D H A可通过诱导细胞发生铁死亡抑制肝癌细胞生长。