棉花半胱氨酸蛋白酶基因的克隆和表达特性分析

摘要

根据不同植物编码半胱氨酸蛋白酶基因的保守序列，设计兼并引物，通过PCR和RACE技术，从辽棉9号衰老叶片中克隆了编码半胱氨酸蛋白酶的cDNA，其相应的基因命名为Ghcysp，该基因序列的长度为1368bp，包含一个1034bp的可读框，编码344个氯基酸，分子量为37．88kD，等电点为4．80，数据分析结果显示，该蛋白质由1个19个氨基酸残基组成的信号肽和3个酶活性催化反应中心组成，是一个跨膜蛋白质，位于液胞摸上，Ghcysp蛋白质与其他植物半胱氨酸蛋白酶的氯基酸同源性为67％～82％，Nonhem杂交结果表明，在棉花衰老的根、脱落的花、下胚轴、胚珠和幼叶中，Ghcysp基因不表达，在棉花的衰老叶片中Ghcysp基因表达量高。