S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的原核可溶性表达及其转化应用

摘要

为提高来源于拟南芥的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAM1)在大肠埃希菌中的可溶性表达水平,采用无缝克隆的方法分别将谷胱甘肽巯基转移酶、TrxA蛋白、小分子泛素样修饰物(SUMO)蛋白、MsyB蛋白、泛素类蛋白这5种不同的融合标签与SAM1进行了N端融合表达。结果表明,SUMO蛋白作为融合标签时,SAM1表达菌株的可溶性蛋白表达量显著高于无融合标签的SAM1表达菌株,其细胞内可溶性蛋白总量达到401.19 mg/L。此外,对融合了SUMO蛋白标签的SAM1菌株和原始菌株进行菌体转化研究。结果表明,在菌体量相同的条件下,SUMO蛋白作为融合标签的SAM1表达菌株对底物的转化率为69.80%,相比原始菌株提高了40.51%。因此,选择SUMO蛋白作为融合标签能显著提高SAM1在大肠埃希菌中的可溶表达水平,为下一步对S-腺苷甲硫氨酸合成酶进行工业化应用提供参考。