CYP307A1 RNAi重组小球藻口服喂饲对白纹伊蚊的致死作用

摘要

目的了解沉默白纹伊蚊蜕皮激素合成途径酶基因CYP307A1对伊蚊幼蚊生长发育的影响,为蚊媒传染病的防控提供新的思路。方法利用RNA干扰(RNAi)技术,构建CYP307A1的RNAi表达载体,以小球藻为受体进行电击转化,筛选得到的重组藻株喂食白纹伊蚊幼蚊,使用WPS 2020软件统计并汇总幼蚊的死亡率、化蛹率、羽化率、体长和CYP307A1基因表达量实时荧光定量PCR数据;SPSS 25软件进行各组平均值的单因素ANOVA检验,使用Origin 2019和WPS 2020软件进行图表的制作。结果300只规模实验结果显示,对照组中饲喂过滤水、饲料、野生小球藻和转pMaa7/IR载体小球藻的白纹伊蚊幼蚊死亡率分别为1.50%、0.17%、0.83%和8.00%,而饲喂CYP307A1 RNAi重组小球藻幼蚊死亡率为80.33%,死亡率显著高于各对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。饲喂饲料的伊蚊幼蚊化蛹率为99.83%,羽化率为98.50%,而饲喂CYP307A1 RNAi重组小球藻幼蚊化蛹率为18.50%,羽化率为98.50%,与对照组相比饲喂CYP307A1 RNAi重组小球藻幼蚊的化蛹率和羽化率显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。喂食重组藻株伊蚊幼蚊体内CYP307A1基因表达量比对照组下降79.00%(P<0.01)。结论CYP307A1 RNAi重组小球藻具有抑蚊功能,有望在生物杀蚊领域发挥作用。