N-乙酰半胱氨酸对镉所致DNA损伤保护作用机制的研究

摘要

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对氯化镉(CdCl2)所致猪肾小管细胞系(LLC-PK1)DNA损伤的保护作用,为防制镉危害提供实验依据。方法以LLC-PK1细胞为实验对象,将细胞分为对照组,CdCl2处理组(1.5～6μg/ml),CdCl2与NAC联合处理组(CdCl2处理前1 h加入1 mmol/L NAC)。通过单细胞凝胶电泳(SCGE)试验检测细胞DNA损伤,用免疫组化方法检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OhdG)的表达水平,用2’,7’-二氢二氯荧光素(DCFH)和苯二醛(OPT)测定细胞内活性氧类(ROS)以及还原性谷胱甘肽(GSH)水平。同时,以NAC为干预物,观察其对上述效应终点的影响。结果 CdCl2可致细胞DNA链断裂,诱发细胞内ROS产生增多,GSH水平下降,细胞核内8-OhdG表达增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。NAC预处理后使DNA链断裂有所减轻,降低了ROS和8-OhdG表达水平,同时升高了GSH水平(P<0.05或P<0.01)。结论 NAC可有效的预防CdCl2引起的LLC-PK1细胞DNA损伤。