新冠病毒核酸检测关键影响因素分析

摘要

目的分析影响新冠病毒核酸检测结果的各种关键因素,提出改善核酸检测质量的具体措施。方法选择4个品牌的八联管耗材、4种核酸提取试剂、4种核酸扩增试剂和2个品牌荧光定量PCR仪,用新冠病毒核酸阳性质控品,比较耗材、试剂和仪器对新冠病毒核酸检测结果的影响。结果4种不同厂家的八联管检测结果Ct值差异有统计学意义(P<0.05),扩增八联管j的阳性质控品ORF1ab基因、N基因和IC基因的检测Ct值最小,荧光强度值最大。4种不同品牌试剂提取的核酸A260/A280比值差异有统计学意义(P<0.05),其中试剂a提取的核酸纯度最高,ORF1ab基因、N基因和IC基因的检测Ct值最小。4种扩增试剂和2种荧光定量PCR仪搭建的8个检测系统对应的ORF1ab、N和IC基因检测Ct值变异系数(CV)均小于5%,具有较好的批内重复性,其中aft检测系统的变异系数最小,批内重复性最好。结论实验耗材、提取试剂和扩增试剂均可影响新冠病毒的核酸检测结果,建议尽量选择原厂或大品牌的耗材、提取和扩增试剂;在投入使用前做好技术性验收和性能验证,保证检测结果准确性。